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改良Skirrow氏琼脂基础的原理及实验现象

放大字体  缩小字体 发布日期:2024-03-01  来源:青岛海博生物  作者:纪英姿  浏览次数:33
核心提示:改良Skirrow氏琼脂基础的原理及实验现象
一、用途:
  用于空肠弯曲杆菌的分离培养(GB4789.9-2014GB4789.28-2013ISO标准)
二、实验原理:

  蛋白胨、酵母浸粉和胰酪蛋白胨提供碳源、氮源、维生素和矿物质;氯化钠提供均衡的渗透压;无菌冻融脱纤维羊血提供额外的营养物质;铁、焦亚硫酸钠和丙酮酸钠有利于空肠弯曲菌的生长;TMP、多粘菌素B和万古霉素可抑制样本中非弯曲菌的生长,从而便于分离空肠弯曲菌;琼脂是凝固剂。
三、培养基配方(g/L):
蛋白胨 15.0
酵母浸粉 5.0
胰酪蛋白胨 2.5
氯化钠 5.0
琼脂 5.0
pH 7.4±0.2 25℃


    FBP溶液:丙酮酸钠、焦亚硫酸钠、铁各0.25g溶解于100mL纯化水中,用0.22μm微孔滤膜过滤除菌。

    抗生素溶液:称取头孢哌酮0.032g,两性霉素B0.01g,利福平0.01g,溶解于5mL 50%无菌乙醇溶液中。
    配制方法:称取基础培养基4.25g,加热搅拌溶解于100ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟,冷至50-55℃左右时,加入1ml过滤除菌的FBP浓原液、一支改良Skirrow氏琼脂基础添加剂(万古霉素mgTMP0.5mg,多粘菌素B 250 IU1mL和无菌冻融脱纤维羊血5ml,混匀,倾入无菌平皿。

四、试验方法
  1、制备质控菌液。
  2、将质控菌液划线接种于平板。
  342±1℃微需氧培养24-48小时,记录实验结果。
五、结果观察与解释

  接种以下质控菌株,42±1℃微需氧培养24-48小时:

质控菌株 菌株编号 生长情况 其他特征
空肠弯曲菌 ATCC33291 +++ 灰色扁平湿润有光泽,呈沿接种线向外扩散
大肠埃希氏菌 ATCC25922 - /
金黄色葡萄球菌 ATCC25923 - /


 图1-1 改良Skirrow氏琼脂基础质控结果

a:空肠弯曲菌,b:大肠埃希氏菌,c:金黄色葡萄球菌

六、注意事项

本培养基仅为细菌鉴定的一部分,需做其他补充试验。

 

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