一、试验原理:
本培养基用于金黄色葡萄球菌的选择性分离培养。
明胶蛋白胨、酵母浸粉为微生物的生长提供氮源、碳源及维生素;甘露醇为可发酵糖类;酚红为酸碱指示剂;磷酸氢二钾为pH缓冲剂;甘氨酸和氯化锂对金黄色葡萄球菌以外的其它菌株有抑制作用;较高浓度的亚碲酸钾可抑制多数杂菌的生长,金黄色葡萄球菌可还原亚碲酸钾,使菌落显黑色,同时可分解培养基中的甘露醇产酸,使培养基变黄;琼脂是培养基的凝固剂。
二、培养基配方(g/L):
明胶蛋白胨 |
10.0 |
酵母浸粉 |
5.0 |
甘露醇 |
10.0 |
酚红 |
0.025 |
磷酸氢二钾 |
5.0 |
氯化锂 |
5.0 |
甘氨酸 |
10.0 |
琼脂 |
16.0 |
pH 7.2±0.2 |
三、试验方法:
1、称取本品61.0 g,加热搅拌溶解于1000 mL蒸馏水中,煮沸1分钟,121℃高压灭菌15min,冷至45-50℃左右时,加入20 mL过滤除菌的1%亚碲酸钾溶液,混匀,倾入无菌平皿。
2、制备质控菌液,接种到培养基上。
3、放置于30-35℃恒温培养箱中需氧培养24-48小时。
四、结果观察与解释
接种以下质控菌株,放置于30-35℃恒温培养箱中需氧培养24-48小时。
质控菌株 | 菌株编号 | 接种量 | 回收率 | 生长情况 | 其它特征 |
金黄色葡萄球菌 | ATCC 25923 | 10-100 | ≥70% | +++ | 黑色菌落,菌落周围黄色 |
金黄色葡萄球菌 | ATCC 6538 | 10-100 | ≥70% | +++ | 黑色菌落,菌落周围黄色 |
表皮葡萄球菌 | CMCC(B)26069 | 10-100 | ≥70% | +++ | 黑色菌落,菌落周围黄色 |
大肠埃希氏菌 | ATCC 25922 | 100-1000 | / | - | 抑制 |
图1 V-J琼脂培养基微生物质控结果
a:金黄色葡萄球菌ATCC 25923;b:金黄色葡萄球菌ATCC 6538;
c:表皮葡萄球菌CMCC(B)26069;d:大肠埃希氏菌ATCC 25922