QuEChERS方法用于猪肉中β-受体激动剂的检测
(Copure® QuEChERS)
一、实验目的
本研究利用分散固相萃取(QuEChERS)法作为样品的前处理方法,HPLC法作为分析方法,检测猪
肉中兽药多残留。该方法可简化样品的前处理过程,节省有机溶剂的使用,操作简便。
二、实验目标物
沙丁胺醇(CAS:18559-94-9),莱克多巴胺(CAS:97825-25-7)。
三、应用范围
本方法适用于猪肉中β-受体激动剂的HPLC检测及确证。
四、实验材料
biocomma® Copure® QuEChERS(Cat. No. COQ050050),
biocomma® Copure® QuEChERS (Cat. No. COQ015601)。
五、实验步骤
1、样品提取
称取经粉碎的猪肉2.5g于50mLQuEChERS离心管中,加入1mL2 mol/L乙酸铵缓冲液(PH=5.2)和
50uLβ-葡萄糖醛苷酶-芳基硫酯酶,37℃酶解过夜。酶解后的试样加入10mL5 %氨水乙腈,涡旋
1 min,再加入QuEChERS提取盐包(Cat.No.COQ050050),用力振摇1min,4000r/min离心
5 min。上层乙腈层待净化。(注:该实验为阴性样品加标实验,省略酶解步骤)。
2、样品净化
取待净化的上层乙腈层5mL于15mLQuEChERS净化管(Cat.No.COQ015601)中,涡旋1min,
4000r/min离心5min,取1mL乙腈净化层于40℃下氮吹至近干,用1mL溶解液(甲醇:0.1%甲酸水
=1:9)重新溶解,过0.22μm滤膜,供上机测试。
3、HPLC仪器条件
设备:WatersAlliance2695
色谱柱:InertSustain-C18(4.6mm×250mm,5 μm)
检测器:Waters2475荧光检测器
检测波长:激发波长:226nm发射波长:306nm
流动相:A:0.1%甲酸水溶液B:甲醇
洗脱方式:梯度洗脱
表1流动相梯度洗脱程序
流速:1.0mL/min
进样体积:20μL
六、实验结果
1、2.0mg/kg猪肉中β-受体激动剂的添加回收率结果
表22.0 mg/kg猪肉中β-受体激动剂的添加回收率结果
2、2.0mg/kg猪肉中β-受体激动剂检测的液相色谱图
图12.0mg/kg猪肉中β-受体激动剂检测的液相色谱图