有报道称生物实验室内有30%-60%的细胞都被支原体污染过,目前,支原体的发现和清除仍然困扰着许多实验室以及研究者,各种试剂以及方法都各有利弊,并且有时候支原体被清除之后,仍然会反反复复,带来许多后顾之忧,寻找一种快速高效简便的方法来清除以及检测支原体,仍然是一个十分迫切的问题。
支原体污染在细胞长期培养过程中经常出现且不易消除,据调查及研究显示,实验室30%-60%细胞都被支原体污染过,其中95%以上是由口腔支原体(M.orale)等5种造成。支原体污染初期, 高倍镜下观察细胞无明显变化但有细小黑色颗粒;随培养时间延长,尽管培养液不浑浊,但pH值变化明显、颜色变黄,在污染后期引起细胞变形,对后续科研产生严重影响,因此在细胞培养过程中进行支原体检测与防治十分必要。
细胞被支原体污染后清除工作特别困难,常见的去除支原体方法包括裸鼠过继法、克隆法、加热去除法以及药物处理方法等。
裸鼠过继法操作比较繁琐,易造成裸鼠细胞污染;克隆法只适用于污染较轻的细胞,由于支原体对热耐受性较差,将细胞置于41℃加热5-10h(依据细胞本身的耐热性确定作用时间)以杀灭支原体。由于上述方法的局限性,目前实验室大多采用抗生素进行处理并取得较好的效果,效抑制支原体活性的抗生素主要为四环素类、大环内酯类等。
细胞培养过程中的支原体,是一个世界性的难题。当细胞(特别是传代细胞)被支原体污染之后,细胞内部的DNA、RNA以及蛋白表达发生改变,而细胞的生长率一般并未发生显著的影响,因而细胞被支原体污染一般难以察觉。因此,根据实验室的管理经验,支原体污染的预防就显得尤为重要。
为此,润联推出了针对细胞间支原体污染的整体解决方案。
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