发酵车间环境噬菌体污染怎么防治？

噬菌体污染:一般如果为烈性噬菌体污染很好判断(发酵液不能增菌) 但污染了温和噬菌体就很难处理。

证明：拿已知的原始菌株(无噬菌体感染的)作为寄主做平板涂布，将发酵液直接点植在平板上，并做好位置。记号，培养观察，在点植处若出现半透明噬菌斑，那肯定是温和噬菌体污染了。

噬菌体污染往往是先从发酵罐开始的，然后才波及到种子罐。如果细心观察可以发现，当你的发酵罐不正常的时候往往种子罐的种子在镜检时也有异常菌体出现。

通气发酵，空气过滤器对噬菌体的截留能力不一定很好。一般噬菌体要比空气过滤器的孔径还小的多，能够完全进入到发酵罐中。一般发酵罐的通气量要比种子罐大，所以也会导致发酵罐比种子罐提前表现出来。

噬菌体防治是个很头疼的问题，涉及到菌种、空气、环境、设备等等。积极的方法是选育抗噬菌株。但在平时也,应该做好环境的消毒工作。消毒重点在于发酵罐，管路，及空间。

噬菌体是一类专性寄生于细菌和放线菌等微生物的病毒，其个体形态极其微小，用常规微生物计数法无法测得其数量。当烈性噬菌体侵染细菌后会迅速引起敏感细菌裂解，释放出大量子代噬菌体，然后它们再扩散和侵染周围细胞，终使含有敏感菌的悬液由混浊逐渐变清，或在含有敏感细菌的平板上出现肉眼可见的空斑──噬菌斑。了解噬菌体的特性，快速检查、分离，并进行效价测定，对在生产和科研工作中防止噬菌体的污染具有重要作用。

　　检样可以是发酵液、空气、污水、土壤等(至于无法采样而需检查的对象，可以用无菌水浸湿的棉花涂拭表面作为检查样品)。为了易于分离可先经增殖培养，使样品中的噬菌体数量增加。

　　采用微生物测定法进行噬菌体检测，约需12h左右，因而不能及时判断是否有噬菌体污染。通过快速检测可大致确定是否有噬菌体污染，以采取必要的防治措施。根据正常发酵(培养)液离心后菌体沉淀，上清液蛋白含量很少，加热后仍然清亮；而侵染有噬菌体的发酵(培养)液经离心后其上清液中因含有自裂解菌中逸出的活性蛋白，加热后发生蛋白质变性，因而在光线照射下出现丁达尔效应而不清亮。此法简单、快速，对发酵液污染噬菌体的判断亦较准确。但不适于溶源性细菌及温合噬菌体的诊断，对侵染噬菌体较少的一级种子培养液也往往不适用。 

一旦发酵菌浸染噬菌体后，就要从菌种，培养基，环境，发酵系统管路，地沟，污水池，排风口等进行全面的消毒排查，物理消毒方式通常很难将噬菌体消除，通常需要物理和化学方式相结合处理噬菌体污染。

必要暂停发酵培养工作，对整个发酵环境，管路，器材进行消毒处理，可用紫外灯照射加过氧化氢干雾熏蒸的方式对整个发酵场所进行消毒，在不影响生产的情况，可以停止发酵一个月的时间，让发酵环境的活大肠杆菌消除或减少到限度。 

发酵生产环境或实验室空间化学熏蒸比较安全可靠的方法是过氧化氢气体灭菌方式，代替传染有害有毒的甲醛熏蒸。过氧乙酸和甲醛已被否定，目前流行和被接受的是VHP过氧化氢空间灭菌，其广谱、高效、安全无害，无残留的消毒方法成为新一代选择。在解决发酵生产中预防和防治噬菌体浸染问题具有重大意义，这里需增强防重于治的意识，也就是说需要定期的环境空间全面熏蒸消毒。那么过氧化氢干雾灭菌装置必不可少，因为要经常使用，并且可以短时间内完成消毒，运行成本低，不能造成不良腐蚀影响等。

 润联从事发酵生产数十年，熟悉噬菌体污染的综合解决方案，具备丰富的一线操作实践经验，能够彻底杀灭和解决噬菌体问题。依托比利时诺福杀菌产品为用户量身定制符合实际条件的低成本噬菌体污染解决方案。

叠加由研发的比林科汉过氧化氢干雾消毒机产品，为解决噬菌体创造了基础硬件设施。比林科汉过氧化氢干雾消毒技术，智能化、数字化、可视化的全自动发酵车间消毒方式广泛受到关注。其采用冷蒸发文丘里干雾技术原理，干雾技术累积十五年，世界性先进，干雾气体肉眼不可见、无孔不入。

 突破性解决了过氧化氢消毒有腐蚀性的普遍问题，取代了VHP汽化过氧化氢、高温闪蒸、电离等高浓度腐蚀性方式，以进口比利时杀菌产品为基础的高活性杀菌、低浓度即可达到的效果。其结合比林科汉干雾消毒机，的干雾扩散和自由布朗运动，在出雾颗粒方面，甚至远超同类设备，真正的目中无雾（干雾），不留任何污染的地方，实现更温和的消杀手段和更好的材料兼容性。钟成认为具有以下优点。

1）发酵车间或实验室整体房间快速杀灭噬菌体、病原体，细菌，真菌，霉菌和病毒，广谱的杀菌效果；

2）快速高效省时，当天灭菌即可当天投产使用；

3）杀灭噬菌体效果达到＞99.999%，并且是比较彻底全面覆盖；

4）消杀全过程无需人员值守，自动化工作，可在外面远程控制，动态实时监控消杀过程；

5）专业化的服务方案及GMP规范指导，完善的效力验证文件及报告。 

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