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逗点生物新动态 可用于牛奶中Hydrocortisone检测

放大字体  缩小字体 发布日期:2018-05-23  来源:逗点生物  作者:逗点生物  浏览次数:23
核心提示:逗点生物Copure固相萃取柱已广泛应用于基因检测、新药研发、临床诊断、食品安全、环境保护、工业品检测和生命科学等领域。在逗点生物的实验室将为您贡献更多的SPE应用。

牛奶中Hydrocortisone检测的固相萃取方法(Copure® Silica)


一、实验目的
本研究利用固相萃取法作为样品前处理方法,HPLC法作为检测手段。该方法操作方便,可简化样品的前处理过程,节省有机溶剂的使用。


二、实验目标物
(CAS:50-23-7)。


三、应用范围
本方法适用于牛奶中Hydrocortisone的检测及确证。


四、实验材料
Biocomma®Copure® Silica固相萃取柱500mg/6mL(Cat.No.COSIL6500)。


五、实验方法
1、样品提取
称取牛奶试料5 g于50 mL离心管中,加30 mL乙酸乙酯,均质1 min,350 r/min摇床振动20 min,4200 r/min离心10 min,移取乙酸乙酯层。残渣中加乙酸乙酯25 mL,均质1 min,350 r/min摇床振动20 min,4200 r/min离心10 min,移取乙酸乙酯层。合并两次提取液,40 ℃旋转至近干,加乙酸乙酯1 mL和正己烷5 mL,溶解残渣,待净化。


2、SPE柱净化
(1)活化:用6 mL正己烷活化Silica固相萃取柱。
(2)上样和洗脱:取待测液,通过Silica固相萃取小柱富集,弃去流出液。用6 mL正己烷淋洗固相萃取柱,真空抽干5 min,弃去流出液。用6 mL正己烷-丙酮(6:4, v/v)洗脱萃取柱,收集洗脱液。
(3)重新溶解:洗脱液于40 ℃氮气吹干,加20%乙腈水溶液2.0 mL溶解残余物,过0.22 μm滤膜,供高效液相色谱测定。


3、HPLC条件
设备:Waters Alliance 2690
检测器:Waters 2487 双波长检测器
检测波长:254 nm
色谱柱:Welch Ultimate XB-C18 (4.6X250mm)
流动相:A:乙腈    B:0.1%甲酸水溶液
洗脱方式:梯度洗脱
表1  梯度洗脱条件


流速:1 mL/min
进样体积:20 μL


六、实验结果
1、 牛奶中的1mg/kg添加回收结果
表2  牛奶中的1mg/kg添加回收结果



2、 添加水平为1mg/kg牛奶中检测色谱图
图1  添加水平为1mg/kg牛奶中检测色谱图

 

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