逗点生物新发布血清中β-受体激动剂检测的固相萃取方法 HLB

血清中β-受体激动剂检测的固相萃取方法

（Copure® HLB）

一、实验目的

本研究利用固相萃取法作为样品的前处理方法，HPLC法作为分析方法，检测血清中β受体激动剂含量。该方法可简化样品的前处理过程，节省有机溶剂的使用，操作简便。

二、实验目标物

沙丁胺醇(CAS:18559-94-9)、班布特罗(CAS:81732-65-2)、克伦特罗(CAS:129138-58-5)、莱克多巴胺(CAS:97825-25-7)。

三、应用范围

本方法适用于血清中β-受体激动剂的检测的HPLC检测及确证。

四、实验材料

biocomma® Copure® HLB固相萃取柱60 mg/3 mL (Cat. No. COHLB360)。

五、实验步骤

1、样品提取

准确移取样品1.0mL血清样品，备用。

2、SPE柱净化

(1)活化：HLB固相萃取柱使用前用1mL甲醇、1mL水活化。

(2)上样和洗脱：在HLB固相萃取柱上加入1mL血清样品，弃去流出液；用1 mL 5%甲醇水溶液（v/v）、淋洗，弃去淋洗液；抽干小柱；用2mL甲醇溶液洗脱，收集洗脱液（整个上样、洗脱过程保持流速1mL/min）。

(3)重新溶解：50℃缓慢氮气流条件下吹至近干，用1 mL 甲醇溶解。经0.22μm滤膜重新过滤，供高效液相色

谱测定。

3、HPLC条件

设备：Waters Alliance 2695

色谱柱：Welch Ultimate XB-C18 (4.6×250mm)

检测器：Waters 2475 荧光检测器

检测波长：激发波长：206 nm

发射波长: 226 nm

流动相：A:乙腈B: 0.1%甲酸水

表1:梯度洗脱条件

流速：1.0 mL/min

进样体积:20μL

六、实验结果

1、1mg/kg血清中β-受体激动剂的添加回收结果

表1 1 mg/kg血清中β-受体激动剂的添加回收结果

2、添加水平为1mg/kg血清中β-受体激动剂检测的液相色谱图

图1添加水平为1mg/kg血清中β-受体激动剂检测的液相色谱图