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【微生物检测】浅谈微生物盲样心得!

放大字体  缩小字体 发布日期:2017-12-06  来源:食品实验室服务公众号  浏览次数:240
核心提示:微生物检测这个命题相信大家都不会陌生,毕竟我们都是从事这方面工作的。在实验室里,我们需要跟各种检测方法、细菌真菌以及检测设备等打交道,对微生物检测领域也肯定会存在这样或者那样的问题,面对这些问题你是怎么解决的?你有哪些好的微生物检测工作经验?
 微生物检测这个命题相信大家都不会陌生,毕竟我们都是从事这方面工作的。在实验室里,我们需要跟各种检测方法、细菌真菌以及检测设备等打交道,对微生物检测领域也肯定会存在这样或者那样的问题,面对这些问题你是怎么解决的?你有哪些好的微生物检测工作经验?

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【微生物检测】浅谈微生物盲样心得!

作者:张珍

 

毕业一年,从事微生物检测也有一年之余,记得刚毕业来到公司的时候,领导问我想要干哪个,我说都行,因为在学校学的都是书本知识,动手操作能力较差,所以,当时觉得干那个都得从头学。就这样,我被安排到了微生物组,从此与微生物就有了不解之缘。

 

八月底我们接到一个沙门氏菌盲样,需要我们检验确定是不是沙门氏菌,由于那个时候没有经验,所以一直跟在师傅身后,我们先将盲样接种到营养肉汤以保存菌,然后按照标准划线接种于BS,HE和沙门氏菌显色培养基上,同时接种到TTB和SC进行后增菌,当时我们按照标准,一直等培养时间到了,才看平板上长的菌落形态是不是可疑菌落,若可疑,再做生化鉴定和血清学鉴定,同时我们用API20E做生化,查编码。将TTB和SC继续划平板 观察菌落形态,做法同上。


不久,公司进行地址变更,我们又接到一个大肠菌群计数盲样,我们按照作业指导书将冻干粉溶解,然后逐层进行稀释,做稀释度,当时我们是一个人做的,然后每个稀释度和平时一样,只做了两个平板,做了七八个稀释度,可是当结果出来的时候,同一稀释度不平行,不同稀释度之间也不成正比,我们只得硬着头皮往下接BGLB ,还好最后结果对上了,可我却在不停反思为什么会这样。

 

就这样,我们接下来的几次认证我一直按照师傅说的,老老实实按照标准做,可是,由于认证专家来的时间紧 ,每次我都发现时间不够,而且每次我们匆匆忙忙的做,但是结果都不是很确定,我一直在思考我们要怎样在有限的时间内把盲样做出来,而且把握能大一点。慢慢的,我的心里有了一点构思,但是还没有实践。

 

刚好,公司进行扩项,专家老师给了我们一管单核细胞增生李斯特氏菌盲样斜面,这次,我打算将自己的构思运用到实践中,和以前一样,我们先将盲样接种到营养肉汤进行保存,然后划线接种于李斯特显色培养基和PALCAM培养基,同时在其他可能致病菌平板上也划(BS,HE,BP,EMB等),这时候,我并没有和以前一样,傻傻的在等平板上长出菌落,而是做革兰氏染色镜检,发现为革兰氏阳性杆菌,直接把革兰氏阴性菌排除在外,同时做李斯特特有的生化现象(SIM动力试验,过氧化氢酶试验,溶血时间及用单核李斯特生化试剂盒做生化)。通过生化我们发现SIM有动力,过氧化氢酶阳性,但溶血为宽的、轮廓清晰的β-溶血,同时生化,鼠李糖阴性,木糖阳性,发现与单核细胞增生李斯特氏菌生化不符,与伊氏李斯特氏菌相符。待平板上立即长出可疑菌落后,不用等到培养时间,立即上述生化,发现与上述现象相符,最后,我们就很肯定的报是伊氏李斯特氏菌不是单核细胞增生李斯特氏菌,结果正确。

 

我相信,许多人和我一样,刚开始做盲样的时候,紧张,不知所错,总觉得时间不够用,所以,我们要善于发现,善于总结,微生物是一个知识积累的过程。

 

通过前面大大小小多次的盲样认证,我自己总结了一点经验。


如果是像大肠菌群冻干粉类计数的,首先,需要两组或三组人做对比,要使一个人出了问题,可以看其他人的,然后,多做几个稀释度(我们一般做六到八个),每个稀释度多做几个平板。


如果是斜面混合菌种:

①先将盲样接种到营养肉汤培养,后期如果有问题可以用来做。

 

②划线接种于特定平板,也可以多划几种,有后增菌的可同时进行后增菌,然后划平板。

 

③做革兰氏染色将菌划分为两大类(革兰氏阳性或阴性,球菌、杆菌或弧菌等),心里有初步判定。

 

④做特有的生化反应(氧化酶、溶血、动力试验等)。

 

⑤用生化试剂鉴定盒再次确认,有些可同时用API20E做。

 

⑥待平板上长出菌落,立即重复上述生化,再次确认上述结果。

注:API20E可用于鉴定肠杆菌科 和其他革兰氏阴性杆菌。

    平板上长出菌落立即做生化,不用等到培养时间,节约时间。

 

以上就是我自己总结的一些经验,希望可以带给大家一丝启发,同时可能也有许多说的不正确的地方,希望大家可以指出。

 
 

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