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微生物实验室常见20种培养基配方大全!

放大字体  缩小字体 发布日期:2017-10-12  来源:食品实验室服务公众号  浏览次数:0
核心提示:一、糖发酵管成分:成分:牛肉膏5g蛋白胨10g蛋白胨10g氯化钠3g磷酸氢二钠 2g0.2%滇麝香草酚蓝溶液12mL蒸馏水1000mLPH 7.4制法1.
 一、糖发酵管

成分:

    成分:

    牛肉膏 5g

蛋白胨 10g蛋白胨 10g

氯化钠 3g

磷酸氢二钠  2g

0.2%滇麝香草酚蓝溶液 12mL

蒸馏水 1000mL

PH 7.4

制法

1. 葡萄糖发酵管按上述成分配好后,0.5%加入葡萄糖,分装于有一个倒置小管的小试管内,121℃高压灭菌15min

2. 其他各种糖发酵管可按上述成分配好后,分装每瓶1000 mL121℃高压灭菌15min。另将各种糖类分别配好10%溶液,同时高压灭菌。将5mL糖溶液加入于100 mL培养基内,以无菌操作分装小试管。

注:蔗糖不纯,加热后会自行水解者,应采用过滤法除菌。

试验方法:从琼脂斜面上挑取小量培养物接种,于36℃±1℃培养,一般观察23d。迟缓反应需观察14~30d

 

二、乳糖胆盐发酵管

成分:

蛋白胨 20g

猪胆盐(或牛、羊胆盐)5g

乳糖 10g

0.04%滇甲酚紫水溶液 25mL

蒸馏水 1000mL

制法:将蛋白胨,胆盐及乳糖溶于水中,校正pH,加入指示剂,分装每管10 mL,并放入一个小倒管,115℃高压灭菌15min

注:双料乳糖胆盐发酵管除蒸馏水外,其他成分加倍。

 

三、5%乳糖发酵管

成分:

蛋白胨 0.2g

氯化钠 0.5g

乳糖 5g

2%溴麝香草酚蓝水溶液 1.2mL

蒸馏水 100mL

pH 7.4

制法:除乳糖以外的各成分:溶解于50mL蒸馏水内,校正pH。将乳糖溶解于另外50mL蒸馏水内,分别灭菌121  15min,将两液混合,以无菌操作分装于灭菌小试管内。

注:在此培养基内,大部分乳糖迟缓发酵的细菌可于ld内发酵。

 

四、缓冲葡萄糖蛋白胨水(MRVP试验用)

成分

磷酸氢二钾 5g

多胨 7g

葡萄糖 5g

蒸馏水 1000mL

制法:溶化后校正pH,分装试管,每管1mL 121℃高压灭菌15min

甲基红(MR)试验:自琼脂斜面挑取少量培养物接种本培养基中,于36±1℃培养25d,哈夫尼亚菌则应在2225℃培养。滴加甲基红试剂一滴,立即观察结果。鲜红色为阳性,黄色为阴性,甲基红试剂配法:10mg甲基红溶于30mL95%乙醇中,然后加入20 mL蒸馏水。

V-P试验:用琼脂培养物接种本培养基中,于36±1℃培养24d。哈夫尼亚菌则应在2225℃培养。加入6%α-萘酚-乙醇溶液0.5mL40%氢氧化钾溶液0.2mL充分振摇试管,观察结果阳性反应立刻或于数分钟内出现红色,如为阴性,应放在36±1℃下培养4h再进行观察。

 

五、营养明胶

成分:

蛋白胨 5g

牛肉膏 3g

明胶 120g

蒸馏水 1000mL

pH 6.8~7.0

制法:加热溶解,校正至pH7.47.6,分装小管,121℃高压灭菌10min,取出后迅速冷却,使其凝固,复查最终pH应为6.87.0

试验方法:用琼脂培养物穿刺接种,放在2225℃培养,每天观察结果,记录液化时间。或放在361℃培养,每天取出,放冰箱内30min后再观察结果。

 

六、苯丙氨酸培养基

成分:

酵母浸膏 3g

DI-苯丙氨酸(或L-苯丙氨酸1g2g

磷酸氢二钠 1g

氯化钠 5g

琼脂 12g

蒸馏水 1000mL

制法:加热溶解后分装试管,121℃高压灭菌15min,使成斜面。

试验方法:自琼脂斜面上挑取大量培养物,移种于苯丙氨酸琼脂,在361℃培养4h1824h,滴加10%三氯化铁溶液23滴,自斜面培养物上流下,苯丙氨酸脱氨酶阳性者呈深绿色。

 

七、蛋白胨水(靛基质试验用)

成分:

蛋白胨(或胰蛋白胨)20g

氯化钠 5g

蒸馏水 1000mL

pH7.4

制法:按上述成分配制,分装小试管,121℃高压灭菌15min

靛基质试剂

柯凡克试剂:将5g对二甲氨基苯甲醛溶解于75mL戊醇中,然后缓慢加入浓盐酸25ml

-波试剂:将1g对二甲氨基苯甲醛溶解于95mL95%乙醇内,然后缓慢加入浓盐酸20 ml。试验方法:挑取小量培养物接种,在361℃培养12d,必要时可培养45d。加入柯凡克试剂约0.5mL,轻摇试管,阳性者于试剂层呈深红色;或加入欧-波试剂约0.5 mL,沿管壁流下,覆盖于培养液表面,阳性者于液面接触处呈玫瑰红色。

注:蛋白胨中应含有丰富的色氨酸。每批蛋白胨买来后,应先用已知菌种鉴定后方可使用。

 

八、硫酸亚铁琼脂(硫化氢试验用)

成分:

牛肉膏 3g

酵母浸膏 3g

蛋白胨 10g

硫酸亚铁 0.2g

硫代硫酸钠 0.3g

氯化钠 5g

琼脂 12g

蒸馏水 1000 mL

制法:加热溶解,校正pH,分装试管,115℃高压灭菌15min,取出直立候其凝固。

试验方法:挑取琼脂培养物,沿管壁穿刺,于361℃培养12d,观察结果。产硫化氢者使培养基变为黑色。

注:肠杆菌科细菌测定硫化氢的产生,应采用三糖铁琼脂或本培养基。

 

九、尿素琼脂

成分:

蛋白胨 1g

氯化钠5g葡萄糖1g

磷酸二氢钾 2g

4%酚红溶液 3 mL

琼脂 20g

蒸馏水 1000 mL

20%尿素溶液 100mL

制法:将除尿素和琼脂以外的成分配好,并校正pH,加入琼脂,加热溶化并分装烧瓶。121℃高压灭菌15min。冷至5055℃,加入经除菌过滤的尿素溶液,尿素的最终浓度为2%,最终pH应为7.2±0.1.分装于灭菌试管内,放成斜面备用。

试验方法:挑取琼脂培养物接种,在361℃培养24h,观察结果。尿素酶阳性者由于产碱而使培养基变为红色。

 

十、氰化钾(KCN)培养基

成分:

蛋白胨10g

氯化钠 5g

磷酸二氢钾 0.225g

磷酸氢二钠 5.64g

蒸馏水 1000 mL

0.5%氰化钾溶液 20 mL

pH 7.6

制法:将除氰化钾以外的成分配好后分装烧瓶,121℃高压灭菌15min。放在冰箱内使其充分冷却。每100 mL培养基加入0.5%氰化钾溶液2.0mL(最后浓度为110000),分装于12mm*100mm灭菌试管,每管约4mL,立刻用灭菌橡皮塞塞紧,放在4℃冰箱内,至少可保存两个月。同时,将不加氰化钾的培养基作为对照培养基,分装试管备用。

 

十一、营养琼脂

成分:

蛋白胨10g

牛肉膏3g

氯化钠5g

琼脂1520g

蒸馏水1000mL

制法:将除琼脂以外的各成分溶解于蒸馏水内,加入15%氢氧化钠溶液约2mL,校正pH7.2~7.4。加入琼脂,加热煮沸,使琼脂溶化分装烧瓶,121℃高压灭菌15min

注:此培养基可供一般细菌培养之用,可倾注平板或制成斜面。如用于菌落计数,琼脂量为1.5%;如作成平板或斜面,则应为2%

 

十二、营养肉汤

成分:

蛋白胨 10g

牛肉膏 3g

氯化钠 5g

蒸馏水 1000mL

pH7.4

制法:按上述成分混合,溶解后校正pH,分装烧瓶,每瓶225 mL 121℃高压灭菌15min

 

十三、缓冲蛋白胨水(BP

成分:

蛋白胨 10g

氯化钠 5g

磷酸氢二钠 9g

磷酸二氢钾 1.5g

蒸馏水1000mL

pH 7.2

制法:按上述成分配好后以大烧瓶装,121℃高压灭菌15min。临用时无菌分装每瓶225mL

注:本培养基供沙门氏菌前增菌用。


十四、EC肉汤

成分:

胰蛋白胨 20g

3号胆盐(或混合胆盐)1.5g

乳糖 5g

磷酸氢二钾 4g

磷酸二氢钾 1.5g

氯化钠 5g

蒸馏水 1000mL

制法:将上述成分混合,溶解后,分装有发酵倒管的试管中,121℃高压灭菌15min。最终pH6.9±0.2

 

十五、四硫磺酸钠煌绿增菌液(TTB

基础培养基

多胨或眎胨 5g

胆盐 1g

碳酸钙 10g

硫代硫酸钠 3g

蒸馏水 1000mL

碘溶液

碘 6g

碘化钾 5g

蒸馏水 20 mL

制法:将基础培养基的各成分加入蒸馏水中,加热溶解,分装每瓶100mL。分装时应随时振摇,使其中的碳酸钙混匀,121℃高压灭菌15min备用。临用时每100mL基础培养基中加入碘溶液2mL,0.1%煌绿溶液1mL

 

十六、亚硒酸盐胱氨酸增菌液(SC

成分:

蛋白胨 5g

乳糖 4g

亚硒酸氢钠 4g

磷酸氢二钠 5.5g

磷酸二氢钾 4.5g

L-胱氨酸 0.01g

蒸馏水 1000mL

1% L-胱氨酸-氢氧化钠溶液的配法:称取L-胱氨酸0.1g或(DL-胱氨酸0.2g),加1mol/L氢氧化钠1.5mL,使溶解,再加入蒸馏水8.5mL即成。

制法:将除亚硒酸氢钠和L-胱氨酸以外的各成分溶解于900mL蒸馏水中,加热煮沸,候冷备用。另将亚硒酸氢钠溶解于100mL蒸馏水中,加热煮沸,候冷,以无菌操作与上液混合。再加入1% L-胱氨酸-氢氧化钠溶液1mL

分装于灭菌瓶中.每瓶100mLpH应为7.0±0.1

 

十七、亚硫酸铋琼脂(BS

成分:

蛋白胨 10g

牛肉膏 5g

葡萄糖 5g

硫酸亚铁 0.3g

磷酸氢二钠 4g

煌绿 0.025g

柠檬酸铋铵 2g

亚硫酸钠 6g

琼脂 18~20g

蒸馏水 1000mL

pH 7.5

制法:

1.将前面5种成分溶解于300mL蒸馏水中。

2将柠檬酸铋铵和亚硫酸钠另用50mL蒸馏水溶解。

3将琼脂于600mL蒸馏水中煮沸溶解,冷至80℃。

4将以上三液合并,补充蒸馏水至1000mL,校正pH,加0.5%煌绿水溶液5mL,摇匀,冷至5055℃,倾注平皿。

注:此培养基不需高压灭菌。制备过程不宜过分加热,以免降低其选择性。应在临用前一天制备,贮存于室温暗处,超过48h不宜使用。

 

十八、三糖铁琼脂(TSI

成分:

蛋白胨 20g

牛肉膏 5g

乳糖 10g

蔗糖 10g

葡萄糖 1g

氯化钠 5g

硫酸亚铁铵 0.2g

硫代硫酸钠 0.2g

琼脂 12g

酚红 0.025g

蒸馏水 1000 mL

pH 7.4 

制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH,加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂。加入0.2%酚红水溶液12.5 mL,摇匀,分装试管。装量宜多些,以便得到较高的底层。121℃高压灭菌15min,放置高层斜面备用。

 

十九、三糖铁琼脂换用方法

成分:

蛋白胨15g

眎胨5g

牛肉膏 3g

酵母膏 3g

乳糖 10g

蔗糖 10g

葡萄糖 1g

氯化钠 5g

硫酸亚铁 0.2g

硫代硫酸钠 0.3g

琼脂 12g

酚红 0.025g

蒸馏水 1000 mL

pH7.4

制法:将除琼脂和酚红以外的各成分溶解于蒸馏水中,校正pH,加入琼脂,加热煮沸,以溶化琼脂。加入0.2%酚红水溶液12.5 mL,摇匀,分装试管,装量宜多些,以便得到较高的底层。121℃高压灭菌15min,放置高层斜面备用。

 

二十、嗜盐性试验培养基

成分:

蛋白胨2g

氯化钠 按不同量加

蒸馏水100 mL

pH7.7

制法:配制2%蛋白胨水,校正pH,共配制5瓶,每瓶100mL。每瓶分别加入不同量的氯化钠:(1)不加;(23g;(37g;(49g;(511g。待溶解后分装试管,121℃高压灭菌15min

 

 


 
 

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